组织解离酶溶液 III

本无菌过滤消化液即开即用，用于贴壁细胞培养的解离及特定组织的消化。处理方便快速，室温下约 1 分钟即可使大多数贴壁细胞脱落。观察到明显形态变化后即可收集细胞，无需等待细胞完全变圆。

(1) 贴壁细胞解离：1) 吸去培养基，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养基清洗细胞一次，去除残留血清。2) 加入少量足以覆盖细胞的胰蛋白酶-EDTA 细胞解离液（含酚红），室温孵育 30 秒-2 分钟。不同细胞类型所需孵育时间不同。3) 显微镜下观察；当细胞明显收缩、看似已从培养器皿底面脱落，或轻吹即可脱落时，吸去解离液。加入含血清的完全培养基，吹打收集细胞用于下游操作。4) 如消化不足，可再次加入解离液。如消化过度、细胞已开始自行脱落，则用完全培养基收集全部细胞，200×g 离心 5 分钟，去除解离液，用完全培养基重悬后用于后续操作。(2) 组织消化：不同组织所需消化时间差异较大，消化至组织能充分分散即可。